四、 分泌液的采集

（一）陰道分泌物的采集

適于觀察陰道角質(zhì)化上皮細(xì)胞。

1、 滴管沖洗法

用消毒滴管吸取少量生理鹽水仔細(xì)、反復(fù)沖洗被檢雌性動(dòng)物陰道，將沖洗液吸出滴在載波片上晾干后染色鏡檢。也可直接將沖洗液置于低倍顯微鏡下觀察，根據(jù)細(xì)胞類型變化鑒別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)情周期中的不同時(shí)期。

2、棉拭子法

用消毒棉拭子旋轉(zhuǎn)插入動(dòng)物陰道內(nèi)，然后在陰道內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)幾下后取出，即可進(jìn)行涂片鏡檢。有的動(dòng)物如大、小鼠等，陰道液較少，取其陰道液時(shí)，可用先浸濕后又?jǐn)D盡無菌生理鹽水的棉拭子取陰道液，這種棉拭子比干棉拭子容易插入陰道。對(duì)體型較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，也可先按摩或刺激其陰部，而后再采集其陰道液。

3、刮取法

用光滑的玻璃小勺或牛角制的小刮片慢慢插入陰道內(nèi)，在陰道壁輕輕刮取一點(diǎn)陰道內(nèi)含物，進(jìn)行涂片鏡檢。

（二）精液（semen）的采集

1、人工陰道套采精液法

本法適用于犬、豬、羊等大動(dòng)物，采用特制的人工陰道套套在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物陰莖上采集精液。采精時(shí)，一手捏住陰道套，套住雄性動(dòng)物的陰莖，以*套住雄性動(dòng)物的陰莖為佳，插入陰道套后，若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)出低叫聲，表明已經(jīng)射精。此時(shí)可取下陰道套，拆下采精瓶，取出精液，迅速做有關(guān)檢查。

2、陰道栓采精法

本法是將陰道栓涂片染色，鏡檢凝固的精液。陰道栓是雄性大、小鼠的精液和雌性陰道分泌物混合，在雌鼠陰道內(nèi)凝結(jié)而成白色稍透明、圓錐形的栓狀物，一般交配后2～4小時(shí)即可在雌鼠陰道口形成，并可在陰道停留12～24小時(shí)。

3、其他采精液法

將發(fā)情的雌性動(dòng)物放在雄性動(dòng)物一起，當(dāng)雄性動(dòng)物被刺激發(fā)情后，立即將雄性動(dòng)物分開，再用人工法刺激其射精。也可按摩雄性動(dòng)物的生殖器或用電流等物理方法刺激雄性動(dòng)物的陰莖或其他性敏感區(qū)，使雄性動(dòng)物被刺激發(fā)情，直至射精，用采精瓶采集射出的精液。

（三）乳汁的采集

用按摩擠奶收集乳汁的方法適合犬、豬、羊等大動(dòng)物乳汁的采集。選用哺乳期的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在早上采集乳汁量zui多，用手指輕輕按摩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物乳頭，使乳汁自然流出，如乳汁不能自然流出，可張開手掌從乳房基底部朝乳頭方向按摩、擠壓整個(gè)乳房，即可擠出乳汁。

五、消化液的采集

（一） 唾液

1、直接抽取法

在急性實(shí)驗(yàn)中，可用吸管直接插入動(dòng)物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液，此法非常簡(jiǎn)單，但從口腔抽吸唾液會(huì)有雜質(zhì)混入。

2、制造腮腺瘺法

在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集狗的唾液，要用外科手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外，即以腮腺導(dǎo)管為中心，切成一直徑約2～3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片，與周圍組織分開，穿過皮膚切口引到頰外，將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合，腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。

（二）胃液

1、直接收集胃液法

急性實(shí)驗(yàn)時(shí)，先將動(dòng)物麻醉，將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi)，在灌胃管的出口連一注射器，用此注射器可收集到胃液，此法適用于狗等大型動(dòng)物。如是大鼠，需手術(shù)剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理鹽水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，進(jìn)行分析。

2、制備胃瘺法

在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集胃液多用胃瘺法，如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動(dòng)物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進(jìn)行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法，可以待動(dòng)物恢復(fù)健康后，在動(dòng)物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。

（三）胰液和膽汁

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，主要是通過對(duì)胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部，在緊靠腸壁處切開胰管，結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連，即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個(gè)總管，在其入腸處插管固定，并在近肝門處結(jié)扎和另行插管，可分別收集到胰液和膽汁。有時(shí)也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。

六、腦脊液的采集

（一）狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法

穿刺部位在兩髂連線中點(diǎn)稍下方第七腰椎間隙。動(dòng)物輕度麻醉后，側(cè)臥位固定，使頭部及尾部向腰部盡量彎曲，剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動(dòng)物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚，右手持腰穿刺針垂直刺入，當(dāng)有落空感及動(dòng)物的后肢跳動(dòng)時(shí)，表明針已達(dá)椎管內(nèi)（蛛網(wǎng)膜下腔），抽去針芯，即見腦脊液流出。如果無腦脊液流出，可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針方向及角度，如果腦脊液流的太快，插入針芯稍加阻塞，以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。

（二）大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法

在大鼠麻醉后，頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒，用手術(shù)刀沿縱軸切一縱行切口（約2cm）用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血，zui深層附著在骨上的肌肉用手術(shù)刀背刮開，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉，防止感染。采完腦脊液后，應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水，以保持原來腦脊髓腔的壓力。

七、骨髓的采集

1、大鼠、小鼠骨髓的采集

用頸椎脫臼法處死動(dòng)物，剝離出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液，沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查，可將胸骨或股骨剪斷，將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上，混勻后涂片涼干即可染色檢查。

2、大動(dòng)物骨髓的采集

狗等大動(dòng)物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動(dòng)物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚，然后估計(jì)好皮膚到骨髓的距離，把骨髓穿刺針的長(zhǎng)度固定好。操作人員用左手把穿刺點(diǎn)周圍的皮膚繃緊，右手將穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直刺入，穿入固定后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入，當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時(shí)常有落空感。狗骨髓的采集，一般采用髂骨穿刺。狗等大動(dòng)物常用的骨髓穿刺點(diǎn)：胸骨：穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各點(diǎn)的中點(diǎn)。脛骨：穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔，防止發(fā)生氣胸。